PRODUCCIÓN DEL ALERGENO RECOMBINANTE DE “CHENOPODIUM ALBUM” CHE A 1, Y SISTEMA DE AISLAMIENTO Y PURIFICACIÓN
RESUMEN
Producción del alérgeno recombinante de Chenopodium album Che a 1, y sistema de aislamiento y purificación. La invención consiste en la producción de la proteína Che a 1, mediante tecnología recombinante en la levadura Pichia pastoris, que implica el uso de la secuencia nucleotídica caracterizada por SEQ ID NO:1 o de otras secuencias nucleotídicas obtenidas por mutagénesis de la secuencia SEQ ID NO: 1.Para ello se ha aislado a partir de polen de Chenopodium album, purificado y caracterizado un alérgeno principal que es reconocido por más del 60 % de los pacientes alérgicos a esta fuente biológica. Asimismo se ha clonado y expresado el DNA recombinante que codifica el alergeno Che a 1 de polen de ceñigo (Chenopodium album). Este alérgeno tiene homología con proteínas de abedul y ballico. La proteína recombinante producida en la levadura (Pichia pastoris) se aísla con gran rendimiento, está correctamente plegada y exhibe propiedades inmunológicas equivalentes a las del alérgeno natural por lo que tanto ella como las proteínas homólogas, las formas modificadas derivadas de ellas, los fragmentos derivados que contengan al menos un epítopo alergénico, pueden ser empleadas en protocolos de diagnosis e inmunoterapia.
SECTOR DE LA TÉCNICA
La presente invención se refiere a uno de los alérgenos del polen de ceñigo (Chenopodium album), la proteína Che a 1, y a epítopos alergénicos presentes en la proteína. La invención también hace referencia a los DNAs recombinantes que codifican tanto proteínas completas como fragmentos que incluyen al menos un epitomo de la molécula, así como moléculas homologas de Che a 1 con capacidad alergénica en otras especies relacionadas y no relacionadas. En concreto el objeto de la invención consiste en la producción de la proteína Che a 1, mediante tecnología recombinante en la levadura Pichia pastoris, que implica el uso de la secuencia nucleotídica caracterizada por SEQ ID NO:1 o de otras secuencias nucleotídicas obtenidas por mutagénesis de la secuencia SEQ ID NO: 1.
INVENTORES
Rosalía Rodríguez García
María Teresa Villalba Díaz