Complutecno: Biotecnología

IgE HUMANA TRUNCADA PARA BLOQUEAR FceRI

Descripción:

Se propone producir una IgE humana recombinante mediante técnicas de biología molecular, que carezca de los dominios variables de la cadena pesada y de la cadena ligera. Esta IgE truncada, del-V (Figura 1B), tendría los cuatro dominios constantes de la cadena pesada e humana y el dominio constante de la cadena ligera k humana. Esta IgE se expresará (de tal modo que se secrete) en una línea celular del linaje B humano (línea celular de mieloma humano).

Fig. 1: Forma nativa de la IgE (A) y posibles formas alternativas antialérgicas.

¿Cómo funciona?:

Fig. 2: Origen y formación de las reacciones alérgicas (Tipo I).

Las reacciones de tipo I están originadas por la unión de alergenos solubles (habitualmente inocuos) a mastocitos que tienen unida IgE mediante FceRI.

En la primera exposición al alergeno los linfocitos Th2 inducen la activación de linfocitos B secretores de IgE, la cual activará al mastocito.

En una segunda exposición el mastocito activado secretará las sustancias vasoactivas produciéndose la reacción alérgica (Figura 2).

La IgE recombinante que proponemos conserva la capacidad para unirse a los receptores de alta afinidad, evitando que la IgE completa producida por una nueva exposición al alergeno lo haga. Además es incapaz de interaccionar con el alergeno por carecer de regiones variables específicas de unión al mismo, impidiendo la degranulación del mastocito y por tanto la respuesta alérgica. Para su construcción y ensayo se realizarían los siguientes pasos:

• Amplificación, a partir de secuencias de cDNA, de los dominios constantes de la cadena pesada de IgE y de la cadena ligera k. Unión a sus péptidos señal.
• Clonación en vectores de expresión pcDNA3 (dominios constantes de la cadena pesada de IgE) y CEP4 (dominio constante de la cadena ligera k) de Invitrogen (ambos vectores de expresión están disponibles en nuestro laboratorio).
• Transfección a la línea celular B humana L721.221 (disponible en nuestro laboratorio)

Si fuera necesario, podrían suplirse las regiones V_H, C_L y V_L por homólogos monomórficos (VpreB, l5). (Figura 1C)

Ventajas:

Fig. 3: Campos de aplicacion de la tecnología.

Terapia alternativa a la vacunación con alergenos durante largos periodos de tiempo en las alergias refractarias a este tipo de terapia (en general, las más frecuentes).

Mayor estabilidad del constructo frente a otras alternativas ensayadas (Fragmentos Fc de IgE solubles).

Alogenicidad frente a esta IgE truncada muy reducida (al contrario que en estrategias de bloqueo con IgE completa, cuyas regiones variables son objeto de una respuesta inmune que le resta eficacia in vivo) ya que únicamente existe un alelo del gen de la cadena pesada de IgE en la población humana.

En la bibliografía no se encuentra descrita la generación de una IgE de este tipo

¿Dónde se ha desarrollado?:

Este trabajo se ha desarrollado en el Laboratorio de Inmunología de la Facultad de Medicina. Nuestro centro ofrece su contrastada capacidad docente y de investigación a la comunidad universitaria, instituciones públicas y privadas y a todo el cuerpo social.

Además presta regularmente servicios inmunológicos "a la carta" a diversas instituciones públicas y privadas, con una facturación anual de 3,5 millones/año y ayudas de infraestructura y proyectos que rondan los 30 millones/año.

Actualmente se encuentran clonadas la cadena pesada de IgE y la cadena ligera k

Para más información: http://www.ucm.es/info/inmuno
Para contactar con el centro: inmuno@med.ucm.es

[más información sobre el departamento y el grupo de investigación]

Y además:

• El laboratorio de Inmunología dispone del material técnico necesario para la amplificación, construcción de vectores, clonación y ensayo de la IgE recombinante.
• Realización de los ensayos de viabilidad técnica de la IgE recombinante en la línea celular B humana L721.221 (disponible en nuestro laboratorio), para su posible aplicación como vacuna antialérgica.
• Asistencia técnica completa.
• Asesoría libre para la utilización de la tecnología.
• Este Centro dispone del material técnico necesario para la amplificación, construcción de vectores, clonación y ensayo de la IgE recombinante.