Complutecno: Biotecnología

APROXIMACIÓN PROTEÓMICA PARA LA IDENTIFICACIÓN DE ANTÍGENOS DE MICROORGANISMOS PATÓGENOS

Descripción:

Fig. 1: Microfotografía electrónica de levaduras e
hifas de Candida albicans.

La electroforesis bidimensional de alta resolución combinada con western-blotting con sueros de enfermos es una herramienta muy útil para la detección de antígenos de Candida albicans que inducen la formación de anticuerpos en pacientes con candidiasis sistémica. Esta estrategia se puede aplicar a otras especies patógenas.

¿Cómo funciona?:

Mediante electroforesis bidimensional es posible separar mezclas complejas de proteínas, según su carga y su peso molecular. Dichas proteínas se pueden enfrentar a sueros de enfermos con candidiasis sistémica para detectar los antígenos inmunodominantes. La identificación de los antígenos se puede realizar por diferentes técnicas: inmunoblot con anticuerpos específicos, secuenciación amino terminal y espectrometría de masas. Mediante este último procedimiento se puede obtener la huella peptídica de la proteína (MALDI-TOF) y buscarla en las bases de datos. Si la proteína no se identifica de esta forma o no se encuentra en las bases de datos hay que proceder a la fragmentación de péptidos para obtener secuencias internas de la proteína a identificar (nanospray-MS/MS).

Fig. 2: Estrategia para la identificación de antígenos por espectrometría de masas.

Ventajas:

Las principales ventajas que se desprenden de la estrategia descrita para la identificación de antígenos de Candida albicans son:

• Utilización de alguno/s de los antígenos inmunodominantes para el desarrollo de un método de diagnóstico para las candidiasis sistémicas, rápido y específico. Los tests imnunológicos que existen en la actualidad para el diagnóstico de estas infecciones presentan una baja especificidad y/o sensibilidad, y además fallan en la discriminación entre colonización e infección por este microorganismo.
• Posibilidad de desarrollar vacunas mediante el empleo de antígenos protectores.
• Monitorización de la evolución de la infección en los pacientes con candidiasis sistémica, en función de las diferencias de expresión antigénica que muestren.
• Posibilidad de identificación de nuevas dianas para el desarrollo de antifúngicos eficaces frente a este hongo oportunista.

¿Dónde se ha desarrollado?:

Esta estrategia ha sido desarrollada en el Departamento de Microbiología II de la Facultad de Farmacia de la Universidad Complutense, dirigido durante muchos años por el profesor César Nombela, con experiencia acreditada en Microbiología y Biología Molecular de levaduras. Hemos colaborado con la empresa farmaceútica GlaxoWellcome en el desarrollo de estrategias para la identificación de proteínas.

[más información sobre el departamento y el grupo de investigación]

Y además:

Nuestro grupo de investigación ofrece la posibilidad de:

• Extrapolar la estrategia descrita para la identificación de antígenos inmunodominantes en otros patógenos.
• Desarrollar métodos de diagnóstico para otras enfermedades infecciosas.
• Identificar antígenos protectores para el desarrollo de posibles vacunas.
• Formar a profesionales en la utilización de la tecnología proteómica (electroforesis bidimensional e identificación de proteínas).