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| ¿Qué es el ADN antiguo? | Problemática | Aplicaciones | El laboratorio | Equipo investigador |
ESTRUCTURA
Los Laboratorios de ADN antiguo se ubican en la 4ª Planta del Dpto. de Toxicología y Legislación Sanitaria de la Universidad Complutense de Madrid. Las instalaciones consisten en dos laboratorios específicos para ADN antiguo separados y de un laboratorio de uso general.
u Laboratorio de Extracción
Consta de tres salas:
- Sala a: Esta sala es dónde se almacenan las muestras en un arcón de -20ºC y ciertos reactivos a temperatura ambiente. La sala a sirve de antesala a las salas estériles b1 y b2, y es donde los investigadores se equipan para entrar en las mismas. El equipamiento consiste en un buzo con capucha que cubre completamente la ropa, el uso de guantes estériles, gafas de seguridad, gorro para el pelo, mascarilla y peúcos para los pies.
- Sala b1: En ella se realiza la limpieza superficial del hueso/diente mediante Arenadora (Sand-Blaster) y la trituración de la muestra mediante un molino refrigerado con Nitrógeno líquido (Freezer Mill).
- Sala b2: En ella se realiza la irradiación de las muestras con luz ultravioleta, y los procesos de digestión enzimática y extracción del ADN de las muestras óseas o dentales.
Tanto la sala b1 como la b2 están equipadas con fluorescentes de luz UV que destruyen las moléculas de ADN contaminante que, en forma de aerosoles, pudieran flotar en el ambiente.
u Laboratorio de Amplificación
Consta de dos salas:
- Sala a: La sala a sirve también de antesala a la sala estéril b, y es donde los investigadores se equipan para entrar en ella. El equipamiento consiste en un buzo con capucha que cubre completamente la ropa, el uso de guantes estériles, gafas de seguridad, gorro para el pelo, mascarilla y peúcos para los pies.
- Sala b: En ella se realiza el alicuotado de reactivos y muestras y la preparación de las reacciones de amplificación (PCR).
u Laboratorio General
En el laboratorio general , común a otras aplicaciones del laboratorio, se lleva a cabo la amplificación por PCR en un termociclador y todos los procedimientos post-PCR: electroforesis, purificación de los productos de amplificación, secuenciación automática, clonación bacteriana de los productos de amplificación, etc. Dado que estos procedimientos se realizan una vez que el ADN antiguo ha sido copiado por PCR, no entrañan peligro de contaminación por ADN exógeno.
