17.1.-En cebada se ha aislado una pieza de ADN de secuencia única de 12 kb,
uno de sus extremos 5’ se ha marcado con P32 , se han tomado dos
muestras y se ha realizado una digestión parcial de una muestra conla endonucleasa de restricción EcoRI
y de la otra muestra conHindIII.
Los fragmentos resultantes de cada digestión parcial se han separado en un gel
de agarosa obteniéndose los siguientes resultados :
17.2.- Dibuje un esquema del gel de
acrilamida que se obtendría al secuenciar por el método dideoxi de Sanger un
segmento de ADNmolde con la
siguiente secuencia :
17.3.- La siguiente autorradiografía se ha
obtenido por el método dideoxi para averiguar la secuencia de un segmento de
ADN de centeno. Las bases nitrogenadas indicadas corresponden a cada una de las
bases ausentes en el medio. ¿Cuál es la secuencia de este fragmento de ADN ?
17.4.- Un fragmento lineal de ADN de 7Kb se
corta por separado con dos endonucleasas de restricción y luego con una mezcla
de ambas obteniéndose los fragmentos indicados a continuación :
17.5.- En una población de centeno se ha
aislado un gen de secuencia única. Se extrae el ADN genómico de 10 plantas
diferentes de la población, se digiere con EcoRI,
los fragmentos producidos se separan mediante electroforesis en gel de agarosa y
se transfieren mediante un Southern (transferencia en condiciones
desnaturalizantes) a una membrana de nilón. Posteriormente, se hibrida esta
membrana empleando como sonda radiactiva el gen de secuencia única de centeno
clonado en un vector bacteriano. Por último, se realiza una autorradiografía
colocando una película fotográfica junto a la membrana y se revela obteniéndose
los resultados indicados en el siguiente esquema :
17.6.- Se extrae el ADN de todos los
miembros de una familia en la que algunos individuos están afectados por una
enfermedad rara autosómica dominante. Se corta el ADN de todos ellos con una
endonucleasa de restricción, se separan los fragmentos por tamaños, se
transfieren a una membrana y se hibrida con una sonda radiactiva de VNTR. Los
resultados obtenidos aparecen en el siguiente esquema :
